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高效液相色譜熒光檢測儀出問題怎么辦?

高效液相色譜熒光檢測儀出問題怎么辦?: 問提問者：網(wǎng)友 | 2017-10-29

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轉(zhuǎn)載：《分析測試百科網(wǎng)》檢測器故障和解決方法1.檢測器性質(zhì)概述檢測器是液相色譜系統(tǒng)的“眼睛”，測量離開柱的樣品的濃度或質(zhì)量。光電檢測器測量柱流出物的光吸收、熒光和折光率的變化。電化學(xué)和電導(dǎo)檢測器溶液的變化。特殊的樣品用特殊的檢測器。不合適的檢測器測得的結(jié)果也不可靠。2.常出現(xiàn)的UV檢測器故障故障類型故障率（%）噪音 26漂移 12靈敏度 9燈壽命 24氣泡 7 在檢測生物樣品時(shí)可能為主要故障池污染 6其他 8無故障 113.具體故障與解決a.燈故障主要是燈失靈或能量衰減以及燈引起基線噪音。除EC外，檢測器中燈是重要部件。燈失靈，明顯地引起檢測器信號總下降。多數(shù)檢測器有觀察孔或指示器，由此可看見燈工作的情形。但是不可以直接觀察紫外燈，因?yàn)樽贤饩€會(huì)損傷眼睛。基線噪音這是燈失靈更普遍的故障。氘燈打開后有30分鐘的最大噪音，所以每次使用前至少預(yù)熱30分鐘。換燈時(shí)要注意不能在燈上留下指痕。因?yàn)槲床寥サ闹负墼陂_燈后會(huì)引起燈表面永久性的損害。請用軟布或?qū)Ｓ貌羚R紙握住燈，在開燈之前用棉簽蘸取甲醇擦去。新裝上后至少要點(diǎn)燃1小時(shí)以上，才能開始定量分析。b.池故障與解決氣泡是最常見故障。瞬間而過的氣泡會(huì)在色譜圖上出現(xiàn)長噪音尖峰。若感覺到有氣泡，當(dāng)將等調(diào)整670nm左右，戴上防護(hù)眼鏡便可以看到池內(nèi)有一個(gè)圓環(huán)，并不是清晰地綠色圖像。流動(dòng)相脫氣不足會(huì)產(chǎn)生氣泡，池污染會(huì)使得故障加重。用充分脫氣的流動(dòng)相可以帶走氣泡，或用強(qiáng)溶劑通過系統(tǒng)。在正相和反向系統(tǒng)轉(zhuǎn)換的時(shí)候一定要過渡。檢測器阻塞有下列現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力升高，松開檢測器進(jìn)口的接頭壓力降至正常水平。檢測器部分易發(fā)生的地方為進(jìn)口管道或熱交換器、池本身和出口管道。用一般的凈化的溶劑去掉阻塞可能不奏效但可以試試。若是廠家標(biāo)明耐高壓，可用泵打溶劑反沖，常可以去掉堵塞。壓力不要超過6MPa.正常的池不可用此法，一般情況請咨詢廠家的維護(hù)工程師較好。c.池阻塞和污染，如確定是池堵塞，可用注射器回抽溶劑或用泵反沖（耐高壓），一般能疏通。通常此故障較少發(fā)生，而污染是經(jīng)常發(fā)生的。池污染一般是色譜圖的噪音增大，靈敏度降低甚至不出峰，也提高了氣泡的故障率。清洗池前向拆去柱和排空管道，準(zhǔn)備好防護(hù)用品，如眼睛、圍裙、橡膠手套等。池進(jìn)出口都接上細(xì)管徑的聚乙烯管。進(jìn)口管上接10ml的注射器，出口管沒入異丙醇中。清洗程序如下：回抽10ml異丙醇通過池去掉流動(dòng)相殘留。回抽10ml蒸餾水回抽10ml6mol/L硝酸，通過池去掉沉積物，此步應(yīng)小心，要備有防止酸溢出的應(yīng)急措施回抽20ml蒸餾水至少用100mlHPLC級別的水正向通過池。d.池滲漏可能發(fā)生在接頭、池窗的密封墊上，也可能發(fā)生在樣品池或參比池的一側(cè)，或者是石英窗破裂。除了接頭松動(dòng)，池滲漏也可能是管道阻塞、流速較高、池后的阻力大，使池的橫截面承受過高的壓力，嚴(yán)重地引起池破裂。也可能組裝不當(dāng)、墊圈不密封造成的滲漏等。沒有多大把握最好請廠家來維護(hù)。e.測量和參比池配合不當(dāng)，正常情況下UV檢測器用空氣做參比，電路設(shè)計(jì)也無流動(dòng)相本地。用有紫外吸收的流動(dòng)相通過UV檢測器，或是用示差折光檢測器都要在參比池內(nèi)注滿流動(dòng)相。如參比池中流動(dòng)相不與測量池中的流動(dòng)相一樣，本底輸出信號不為零，進(jìn)樣時(shí)有可能出偽峰或倒峰。從濕參比池?fù)Q成空氣參比池時(shí)，要清洗干凈后用干燥的氮?dú)獯蹈?，不能留下溶劑殘留，否則就出“氣泡樣”的故障。f.波長方面的問題主要是次級發(fā)射效應(yīng)、選擇波長不正確、波長的裝置差、波長校正問題、低波長測量問題和單色器等問題。次級發(fā)射效應(yīng)在可見光范圍內(nèi)，使用氘燈做光源可提高靈敏度，但是帶來了次級發(fā)射效應(yīng)。單色器能發(fā)射比設(shè)定值高一級的發(fā)射光，正好是設(shè)定值的一半。如設(shè)定值在405nm，次級發(fā)射光正好是202.5nm，三級發(fā)射光低于干擾波長之下，由于大氣中的氧所吸收。次級發(fā)射光正好在紫外光范圍內(nèi)，即是檢測器在兩種波長下檢測，違反了比爾定律，結(jié)果是非線性的。我們可以用鎢燈在紫外范圍內(nèi)無次級發(fā)射，但是靈敏度下降。用氘燈在高于360nm測定，應(yīng)考慮有次級發(fā)射的可能。在熒光檢測器中，也有這個(gè)問題存在。選擇波長不正確可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性，如有可能應(yīng)選擇在干擾組分的吸收光譜平穩(wěn)的范圍或組分的最高吸收處。在所選波長太靠近流動(dòng)相的吸收范圍，梯度洗脫時(shí)會(huì)增加基線漂移。波長的裝置差，可變波長UV檢測器所采用的機(jī)械轉(zhuǎn)動(dòng)光柵選擇波長。旋轉(zhuǎn)和光柵間的傳動(dòng)裝置由齒輪和桿組成，用久了會(huì)機(jī)械磨損，所選的波長并不真正是您選擇的波長。波長校正問題我們可以用鉻酸鉀在275nm校正吸收波長等方法來處理。低波長測量問題是我們在采用低波長時(shí)，樣品和流動(dòng)相的變化比在高波長下更靈敏。我們要選擇應(yīng)選擇低波長吸收較小的溶劑，通常是乙腈好于甲醇。單色器問題主要是光柵和鏡子蒙上一層污染物，一般這種情況請廠家維護(hù)較好。g.時(shí)間常數(shù)是相應(yīng)時(shí)間的設(shè)定，起著過濾噪音的作用。有些有固定的時(shí)間常數(shù)，有些需要自己設(shè)定。如果太小可能增加短噪音，時(shí)間常數(shù)太大可能出寬峰、峰拖尾和短峰。可用自己的經(jīng)驗(yàn)估算時(shí)間常數(shù)，即選最窄的有關(guān)峰寬的10%作為時(shí)間常數(shù)。h.泵噪音主要引起檢測器折射率的變化與流動(dòng)相的組成、壓力以及溫度由引起的噪音。一般情況要加阻尼器，特別是RI檢測器對波動(dòng)十分敏感。。I.溫度的影響，主要是環(huán)境溫度變化常引起基線漂移，一般情況請使用柱溫箱等設(shè)施或環(huán)境溫度波動(dòng)的控制。j.混合問題，主要是流動(dòng)相不完全混合可出現(xiàn)周期性的基線變化，在示差折光檢測器非常嚴(yán)重，如果改用手動(dòng)混合相對較好。特別是比例懸殊太大時(shí)最明顯。k.線性問題，主要因?yàn)闄z測器或方法上的問題，非線性響應(yīng)是可能的。如仔細(xì)稀釋樣品、選擇波長，良好的方法可以延長線性范圍。檢查線性要在一定的濃度范圍內(nèi)，用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品證實(shí)線性的相關(guān)性；用幾乎澄清的溶劑做流動(dòng)相可擴(kuò)展線性范圍，用強(qiáng)紫外吸收的流動(dòng)相檢測器線性范圍幾乎不到零，建議用無吸收的流動(dòng)相或在流動(dòng)相無吸收的波長下檢測。l.信號線故障主要是記錄器和數(shù)據(jù)系統(tǒng)連接檢測器的信號線引起的。要注意正負(fù)是否接對或線路松動(dòng)、接觸不良。另外就是有良好的接地裝置。m.內(nèi)部自檢沒有通過，我們可以通過其提示信息參閱手冊來解決，最好咨詢廠家維護(hù)工程師。朋友可以到行業(yè)內(nèi)專業(yè)的網(wǎng)站進(jìn)行交流學(xué)習(xí)！分析測試百科網(wǎng)這塊做得不錯(cuò)，氣相、液相、質(zhì)譜、光譜、藥物分析、化學(xué)分析、食品分析。這方面的專家比較多，基本上問題都能得到解答，有問題可去那提問，網(wǎng)址百度搜下就有。: 回答者：網(wǎng)友

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